對于生物樣本脆弱樣本采用電泳,GC,HPLC 等方法分析和處理的樣本都很適于采用離心濃縮.離心濃縮的目的:濃縮樣本,同時還避免以下問題:
A.交叉污染; B:樣本丟失; C:樣本變性; D:樣本活性下降; E: 氧化;
真空離心濃縮儀同時兼備以下優點:a:高的回收率; b:對環境無害; c:操作簡單;
離心濃縮與離心分離技術的區別
1.離心分離:將懸浮的固體從液體中分離出來.
2.離心濃縮溶液,偶爾樣品會完全干燥,在這種情況下, 樣品必須是無機物,或者在干燥后馬上被取走.ZLS-3型真空離心濃縮儀
離心濃縮技術:抽真空,降低氣壓,從而降低溶劑的沸點,使溶劑能在低溫下蒸發給腔體施加熱量 (能量) ,從而提高蒸發速率樣本溫度不會升高 !樣本在適宜的離心轉速下離心,產生少量的“g”離心力,這樣就防止了由于“暴沸”而產生的樣本損失,或者由加熱和離心濃縮很容易引起的離心管內布滿泡沫現象離心濃縮原理:
真空:
1.在既定的氣壓下,溶劑的沸點是固定的.對不同的溶劑施加不同的能量,但對樣品溫度不會產生任何影響,因為樣品的特定的氣壓下沸點是一定的,只要蒸發還在進行,樣品的溫度就沒有變化。
2.降低溶劑的氣壓 (提高真空度)這是一個關鍵因素!.
3.液體的沸點在真空狀態下會降低.真空同時還能將未濃縮的氣體從腔體中吸走,從而減少蒸汽流向冷阱時的遇到干擾和阻力.通過快速蒸發溶劑,可保持樣品的低溫狀態.
能量:
能量(熱量)的輸入,可補充蒸發過程所需要的能量,對于加快蒸發速度是非常重要的能量必須是間接施加給樣品,否則,樣品必然會被局部加熱,從而導致損害樣品.真空狀態下對流是不可能發生的,因此采用輻射加熱腔體溫度能高達 80°C,而樣品的溫度卻能保持在起沸點下 (或許是 5°C) ,直到樣品完全干燥了溫度才會上升。如果樣品在真空狀態下沸點很低,在不給樣品施加能量的情況下讓樣品如果持續蒸發,樣品很可能會結冰… 濃縮也就不可能了!
‘g’ 離心力效應
1.當溶劑蒸發 (沸騰), 會形成氣泡 =>
2.溶劑往往會“暴沸”或起泡,會有小液飛濺到管外.
3.讓樣品在離心濃縮儀里旋轉,產生足夠的‘g’ 離心力,就能讓樣品停留在離心管內.
4.無樣品損失:樣品被濃縮了或干燥后附著在管底,對于定量回收是最理想的.
5.無交叉污染.
6.在角轉頭里,液體的表面積提高了,因此加快了樣品蒸發和濃縮的速率
樣品的安全性:
1.熱敏感樣品是不允許被完全干燥的.
2.在相變過程中能量的吸收引起的低溫效應消失了,也就無法給樣品提供保護.
3.真空壓力計就可以用于判斷是否濃縮的臨界點
4.開始運行以后,馬上觀察最大真空度 [最小氣壓]
5.蒸汽的產生會導致氣壓的上升
6.隨著溶劑的持續蒸發和減少,產生的蒸汽也會越來越少,氣壓也會下降.
7.在達到最小氣壓以前停止運行.
8.樣品仍然是濕的.
結論:如果離心樣品,在一個適宜的離心速度 / ’g’ 離心力,在真空狀態下通過輻射給樣品補充能量樣品將在非常安全的狀態下被濃縮.離心濃縮系統:完整的系統應包含以下部件.
最簡單的配置 :濃縮儀,轉頭,+連接管線+真空泵.
完善的配制 :濃縮儀+轉頭+隔膜泵或高真空油泵以及油過濾器+連接管線,+冷阱+燒瓶+化學阱和吸收柱+真空控制閥+真空壓力計+手推車.
真空離心濃縮儀的功能:離心+ 真空控制(在應用真空以前必須先以足夠的rpm離心)濃縮儀的設計 – 冷阱
赫西冷阱
冷阱特性:
1.循環方式:密閉式循環
2. 溫度設定范圍:常溫~-40℃
3.容量:4升
4.溫度調節精度:±1℃
5.壓縮機冷媒:R404a
6.采用赫西TFT真彩4.3寸屏,觸摸按鍵雙控系統冷阱溫度 。
7.冷阱可與真空離心濃縮儀連用。濃縮儀設計 – 真空泵
赫西能提供兩種類型的真空泵.
(橫隔膜) -無油泵(無油泵非常抗強酸和有機溶劑.)真空旋轉葉片油泵(無油泵不用維護 (不需換油).)
通常情況下都選擇無油泵.在一些特定應用領域,需要用到真空泵
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